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赛尔瑞成“赛多培®噬菌体抑制剂(培养基添加用)”是一种在噬菌体污染环境中仍能够进行微生物培养的培养基添加剂,有效预防微生物发酵时噬菌体污染带来的损失。噬菌体是一类侵害细菌(包括放线菌)的病毒,又称细菌病毒,由于它的个体比细菌小数百倍,可以附着于尘埃上随风飘移,因此能长久地扩散和传播到一定的范围,并能脱离寄主而存活。它在寄主细胞内能大量迅速繁殖子代噬菌体,如在十几分钟至一个小时左右,一个细胞感染一个噬菌体后可以释放出数十个至数百个子代噬菌体。一旦发生噬菌体污染,会导致发酵异常、倒罐,使科研和工业生产遭到严重损失。在发酵工业中,发现发酵菌浸染噬菌体后,就要从菌种,培养基,环境,发酵系统管路,地沟,污水池,排风口等进行全面的消毒排查,消毒流程十分繁琐。一般情况下,实验室或生产线需要暂停发酵两周到一个月的时间,严重影响实验和生产进度。
经多次严格试验测试,赛尔瑞成 “赛多培®噬菌体抑制剂(培养基添加用)”对温和噬菌体和烈性噬菌体均具备出色的抑制作用,能够实现菌体的正常生长和蛋白表达。
赛尔瑞成根据实际操作经验,可以通过下面方法对培养体系的污染情况进行判断:
如果只有细胞碎片,大概率是噬菌体污染;
如果OD600值在1以下时菌出现死亡(菌体生长1-3小时,诱导前),则考虑烈性噬菌体污染;
如果菌前期生长正常达到诱导条件,OD600值在0.8以上,菌在降温诱导之后逐渐开始死亡(有些1-3小时,有些5小时左右),则考虑温和噬菌体污染;
如果同一品种菌在多摇瓶中发生上述不同死菌现象,例如不同发酵周期,有些诱导前死,有些诱导后死,那么考虑混合型污染。
如果同时伴有白色絮状物,或粘性的,或拉丝状的,或蘑菇状的,或有聚集状白色的,则考虑伴随杂菌污染。
首次添加赛多培®噬菌体抑制剂没有效果的原因有多种,常见有如下原因及解决办法:
①摇瓶培养发现过夜菌不长,大概率是菌种活性问题,同时也需要观察是否存在培养条件失控、装液量过大的情况;
解决办法:需要重新转化增加菌种活力,划线再挑一次单克隆(平板上也需要添加噬菌体抑制剂)。
②环境中噬菌体爆发期,多为噬菌体混合型污染(既有温和噬菌体又有烈性噬菌体);
解决办法:可以增加噬菌体抑制剂添加量到千分之六,极限千分之八,这个前提是这个添加量菌可以长起来,建议增加转速(少量菌可能长得会非常慢,持续摇起来),后期正常后抑制剂添加量再降低。
③实验室内部除了噬菌体之外,可能存在真菌、曲霉、金黄色葡萄球菌等杂菌污染;
解决办法:需要进行严格的消毒处理、执行严格的无菌操作规范,以避免杂菌污染带来的影响。
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