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无血清细胞冻存液对比含血清细胞冻存液的优势
发布时间:2019/3/28 14:23:11   点击次数:3607次

 

细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法,其中细胞冻存液,作为细胞冻存时必须使用的一种溶液,不仅仅是说只是用来进行细胞的保存,在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用,因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要。

 

如果不加任何条件直接冻存细胞,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH值改变、蛋白变性等,从而引起细胞死亡。而细胞冻存液就相当于细胞的保护剂,在冻存细胞时将细胞悬浮于冻存液中,可使冰点降低,提高细胞膜对水的通透性,在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞,可以防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤作用。这样就使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,在需要时直接复苏就可恢复细胞活性。

 

传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,统称为含血清细胞冻存液。

 

含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法,如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟,然后移至-20℃冰箱30分钟,再移至-80℃冰箱保存16-18个小时(或隔夜),最后才移至液氮罐中进行长期的储存。
(其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量的死亡。)

 

可见,含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题:

 

1. 冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液,此步可省略)
2. 需要程序降温(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步骤繁琐,耗时耗力
3. 含血清,细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高
4. 血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异
5. 需液氮冻存,且不能原位(如孔板)冻存

 

Cellregen无血清细胞冻存液是不含血清和动物源成分,含DMSO、糖类、氨基酸等成分的一款通用型细胞冻存液。

 

Cellregen无血清细胞冻存液的冻存方法是:将细胞冻存悬液(冻存管或孔板)直接放置-80℃冰箱长期保存。

 

可见,Cellregen无血清细胞冻存液相对于含血清细胞冻存液的优势有:

 

1. 即用型,无需现配,直接将细胞悬浮于冻存液中即可
2. 通用型,适用于冻存各种细胞系、原代细胞
3. 无需程序降温,可直接放置-80℃冻存,操作简单
4. 不含血清,大大减少细胞污染
5. 因不含血清,批次间差异小
6. 无需液氮,-80℃冰箱长期冻存
7. 可培养板整板冻存,例如杂交瘤细胞冻存时可节省筛选过程
 
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